Captura de genes
A captura de genes ou gene trapping é uma abordagem de alto rendimento usada para introduzir mutações insercionais em todo o genoma de um organismo.
Método
A captura é realizada com vetores de captura genética cujo elemento principal é um cassete de captura genética que consiste em um gene repórter sem promotor e/ou marcador genético selecionável, flanqueado por um sítio de splicing 3' a montante (aceitador de splicing; SA) e uma sequência de terminação transcricional a jusante (sequência de poliadenilação ; poliA).
Quando inserido em um íntron de um gene expresso, o cassete de captura genética é transcrito a partir do promotor endógeno desse gene na forma de um transcrito de fusão no qual o(s) éxon(s) a montante do sítio de inserção é(são) ligado(s) em fase ao gene repórter/marcador de seleção. Como a transcrição é terminada prematuramente no sítio de poliadenilação inserido, o transcrito de fusão processado codifica uma versão truncada e não funcional da proteína celular e do gene repórter/marcador de seleção. Assim, as armadilhas genéticas inativam e relatam simultaneamente a expressão do gene capturado no sítio de inserção e fornecem uma etiqueta de DNA (etiqueta de sequência de armadilha genética, GTST) para a identificação rápida do gene interrompido.[1][2]
Acesso
O Consórcio Internacional de Armadilha Genética (International Gene Trap Consortium) está centralizando os dados e fornecendo linhas celulares modificadas.[3]
Referências
- ↑ Cobellis, G. (23 de fevereiro de 2005). «Tagging genes with cassette-exchange sites». Nucleic Acids Research (em inglês) (4): e44–e44. ISSN 1362-4962. doi:10.1093/nar/gni045
. Consultado em 13 de novembro de 2025
- ↑ De-Zolt, S. (6 de fevereiro de 2006). «High-throughput trapping of secretory pathway genes in mouse embryonic stem cells». Nucleic Acids Research (em inglês) (3): e25–e25. ISSN 0305-1048. PMC 1369290. PMID 16478711. doi:10.1093/nar/gnj026. Consultado em 13 de novembro de 2025
- ↑ «IGTC, International Gene Trap Consortium». igtc.org. Consultado em 13 de novembro de 2025
Bibliografia
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